中文

English

人生就是博-尊龙凯时:DpnI内切酶解决环形载体残留问题

发布时间:2025-01-29   信息来源:尚菲丹

人生就是博-尊龙凯时推出的DpnI是一种限制性内切酶,专门用于切割DNA中的甲基化位点。它的高度特异性使其能够识别GA/TC序列,并且只有在序列中碱基A被甲基化的情况下,才会发生切割;如果碱基A没有被甲基化,则不会进行酶切。

人生就是博-尊龙凯时:DpnI内切酶解决环形载体残留问题

DpnI的应用范围主要集中在线性化载体构建和定点突变实验中。在这些实验中,常用的模板质粒通常源于细菌(如大肠杆菌),这些质粒中含有甲基化修饰,而PCR扩增所产生的新合成DNA则是非甲基化的。DpnI能特异性切割含有甲基化序列的DNA,而不影响未甲基化或半甲基化的DNA,因此它能够有效地降解模板DNA,同时保留扩增产物。这一机制使得在进行点突变实验时,未突变的模板可以被去除,确保了实验结果的准确性。

产品简介:DpnI酶来源于携带肺炎双球菌G41克隆的DpnIR基因的大肠杆菌,其能够有效识别并切割腺嘌呤甲基化的GmATC,但不会切割非甲基化的GATC序列。该酶可以处理来自常用E.coli(dam+)的DNA,而不会影响PCR产物,且不受dam-methylase酶的影响。DpnI广泛应用于分子克隆、基因分型、DNA印迹、限制性片段长度多态性(RFLP)技术和单核苷酸多态性(SNP)研究等多个领域。

产品特点: 1. 特异性:专一性识别腺嘌呤甲基化的GA/TC序列并完成切割。 2. 高效性:1U的DpnI在37℃下反应1小时即可消化1μg的甲基化DNA。

实验案例:研究人员分别使用来自JM110菌株(dam-)和DH5α菌株(dam+)提取的质粒500ng,在20μl的酶切体系中加入10U的DpnI,于37℃下酶切1小时。凝胶电泳分析表明,从DH5α中提取的甲基化质粒能被DpnI完全消化,而从JM110中提取的非甲基化质粒则未受到任何影响。这验证了DpnI在高特异性切割甲基化DNA方面的有效性。

总结:综合以上信息,DpnI作为一种限制性内切酶,凭借其优异的特异性和高效性,成为分子生物学实验中不可或缺的工具。同时,人生就是博-尊龙凯时致力于提供高品质的分子生物学试剂,助力各类生物医学研究的成功。