在生物医学检测中,样本中可能存在的内源性抗体(例如RF、HAMA和异嗜性抗体等)会对检测过程造成干扰,从而导致临床结果的不准确。为了解决这一问题,在检测过程中主动添加适当的阻断剂,可以有效消除这些内源性物质产生的干扰,降低假阳性或假阴性的发生几率,显著提升检测系统的准确性、灵敏度与稳定性。
主动阻断剂的成分与干扰抗体具有较高的亲和力,能够与这些干扰抗体结合,阻止它们与检测抗体或捕获抗体结合。而被动阻断剂则通常使用动物IgG,通过与检测系统抗体在结合位点的竞争,降低干扰的影响,通常需要较高的使用浓度来增强竞争力。
复合型阻断剂通过化学交联的方法将单体IgG交联为大分子聚合物,利用空间位阻效应来提升阻断效果。此外,IgG/RF吸附剂能够与血清中的IgG形成免疫复合物,利用类似结构吸附RF,从而显著提高IgM检测的灵敏度和特异性。
使用阻断剂时的建议包括:首先,阻断剂的最终工作浓度应通过梯度实验来确定,首次使用时建议从较高浓度着手,确认效果后再逐步稀释至适合的浓度,以经济合理的方式使用。其次,应尽可能早地让阻断剂与样本接触,并延长作用时间。对于免疫侧向层析法,建议将阻断剂添加至标记物垫或样品垫的处理液中;而对于酶免试剂盒或化学发光试剂盒,建议将其加入到磁珠液或酶标液中;免疫比浊产品则建议添加至R1工作液中。
在可能的情况下,建议测试多种阻断剂,以找到最合适的产品。由于检测目的物及系统的多样性,当单一阻断剂无法完全满足需求时,组合使用不同的阻断剂是一个有效的解决方案。研究表明,协同组合使用能够提供更好的效果。
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