人生就是博-尊龙凯时推出的哺乳动物蛋白提取试剂盒包含以下成分：5X Buffer 10ml、5X NaCl 10ml、5X SDS 10ml、5X DOC 10ml、5X NP-40 10ml和20X PBS 10ml。为有效保存，试剂盒可在常温下存放，唯有Protease inhibitor cocktail需在-20°C条件下保存，其保质期为24个月。

提取步骤

人生就是博-尊龙凯时推荐的提取步骤如下：

1. 准备细胞裂解缓冲液

根据5X Buffer、5X NaCl、5X SDS、5X DOC和5X NP-40按1:1:1:1:1（v/v）比例配制细胞裂解缓冲液。使用1ml细胞裂解缓冲液可提取106~107个细胞或5~20mg组织中的蛋白质。使用前请加入10μl的Protease inhibitor cocktail。

2. 洗涤细胞或组织

a. 对于贴壁细胞：去除培养基后，用PBS冲洗细胞两次，加入细胞裂解缓冲液（106~107个cells/ml），将容器放入冰袋中，在摇床上孵育30分钟，期间需阶段性重悬细胞，最后收集裂解液。
b. 对于悬浮细胞：将细胞在700xg下离心5分钟，弃去上清，使用PBS冲洗两次，4°C再离心以去除上清。将沉淀重悬于细胞裂解缓冲液中（106~107个cells/ml），放置在冰袋中孵育30分钟。
c. 对于组织：将组织切成小块后，用PBS冲洗两次。添加细胞裂解缓冲液（5~20mg组织/ml），将样品转移至预冷微量匀浆器，在冰上均匀化30~50次。请注意，均质过程对靶蛋白的功能完整性至关重要。

3. 离心和保存

在34°C下，以12,000xg离心10分钟以沉淀细胞碎片，或进行高速离心以制备蛋白质溶液，采用100,000xg离心45分钟。最后，将含有蛋白质的上清液移至冷冻管，保存在冰上以供立即使用，或将蛋白质溶液冷冻于-70°C保存，确保其活性与稳定性。

选择人生就是博-尊龙凯时的蛋白提取试剂盒，获得高效、可靠的实验体验，让您的生物医疗研究事半功倍。